《植物生理学报》 2007, 43(5): 869-872

蜘蛛杀虫肽与Bt-toxin C肽融合蛋白(BGT)基因的原核表达与蛋白质纯化

孙冬，詹亚光*，曾凡锁

东北林业大学生命科学学院，哈尔滨150040

通信作者：詹亚光；E-mail: yaguangzhan@126.com；Tel: 0451-82191752

摘　要：

从质粒pCAMBIA2301-BGT 中获得蜘蛛杀虫肽与Bt-toxin C 肽融合蛋白(BGT)基因编码区全长，并构建了原核表达载体pET28a-BGT。将此质粒转入大肠杆菌BL21 (DE3)中，获得有效表达，新蛋白的分子量约为51 kDa，主要以包涵体形式存在。在变性条件下以不同的咪唑和pH值洗脱方式进行比较，确定以咪唑为金属鳌合亲和柱层析的洗脱条件，获得了纯BGT蛋白。

关键词：蜘蛛杀虫肽；Bt；原核表达；蛋白纯化

收稿：2007-05-30   修定：2007-08-27

资助：国家自然科学基金(30471413)。

蜘蛛杀虫肽与Bt-toxin C肽融合蛋白(BGT)基因的原核表达与蛋白质纯化

孙冬，詹亚光*，曾凡锁

东北林业大学生命科学学院，哈尔滨150040

Corresponding author: ; E-mail: yaguangzhan@126.com; Tel: 0451-82191752

Abstract:

从质粒pCAMBIA2301-BGT 中获得蜘蛛杀虫肽与Bt-toxin C 肽融合蛋白(BGT)基因编码区全长，并构建了原核表达载体pET28a-BGT。将此质粒转入大肠杆菌BL21 (DE3)中，获得有效表达，新蛋白的分子量约为51 kDa，主要以包涵体形式存在。在变性条件下以不同的咪唑和pH值洗脱方式进行比较，确定以咪唑为金属鳌合亲和柱层析的洗脱条件，获得了纯BGT蛋白。

Key words: 蜘蛛杀虫肽；Bt；原核表达；蛋白纯化